Ka taxadarida polyacrylamide jel electrophoresis

· polyacrylamidejel waa in lagu sameeyaa acrylamide monomer, wax bilawga ah ee polymerization, kicinta, iyo xaqa milixda iyo isku darka kaydinta.

· acrylamideiyo BIS (N, N '- methylene double acrylamide) waa matrix gel qaab monomer ah.

Ammonium persulfate wuxuu bilaabay habka polymerization koollada. Samaynta koollada waxay u baahan tahay 10% ammonium persulfate xalinta biyaha lagu diyaariyey. Inta badan macluumaadka ayaa tilmaamay baahida loo qabo isticmaalka firfircoon. Si kastaba ha noqotee, xalka 10% waxaa lagu meeleyn karaa 4 ℃ dhowr toddobaad iyada oo aan la lumin waxqabad la'aan. Samee ilaa 10 ml oo iska tuur marka xabagta ay ku guuldareysato inay isku geyso.

Talo: Boqolkiibaacrylamideisku xigxiga xabagta iyo xabagta borotiinku isku mid maaha. Haddii aad isticmaalayso acrylamide premade: xalinta BIS, hubi inaad hesho dhalada saxda ah.

TEMED (N, N, N', N'- tetramethyl ethylenediamine) waa kicin, ku jira dhalo bunni ah, oo lagu riday qaboojiyaha. Ku dar wax yar ka hor intaadan shubin xabagta.

Polyacrylamide electrophoresis dhalooyinka loo isticmaalo electrophoresis waa in la dhaqo ka hor iyo ka dib mar kasta. Ka dib electrophoresis, ku maydh buraash jilicsan iyo maro biyo kulul oo saabuun ah, ku raaci biyo nadiif ah oo istaag si aad u qallajiso.

· qoyaanka iyo siigadu waxay ku keeni karaan polymer godan. Kahor intaan elektrophoresis, ku nadiifi saxanka dhalada nadiifiye dhalo oo ku tirtir buraash jilicsan. Ku dhaq biyo nadiif ah oo si fiican u qalaji masar warqad ah. Ku luqluqa 70% ethanol ka hor intaadan ku tirtirin warqad waxay caawisaa nadiifinta iyo dedejinta qalajinta. Ku dar muunado acrylamide ah si isdaba joog ah: BIS, biyo, xalinta kaydka, ammonium persulfate, TEMED. Si fiican u rux oo isla markiiba ku shub.

Looma baahna in la nadiifiyo polyacrylamide ka hor polymerization. (Acrylamide waxaa loo isticmaali jiray in lagu rido faakuum si meesha looga saaro xumbo sababtoo ah ogsajiinta waxay joojisaa polymerization.)

Tilmaamaha muunadda xabagta tooska ah.

Ku rid warqad madow sanduuqa hoose, asalka madow si aad u samayso muunad dalool si aad si cad u aragto.
Taangiga xabagta oo buuxsamay, oo ka korreysa kolloidka.
Haddii cidhifku iftiin leeyahay, shid nalka, iftiinku ha iftiimiyo kolloid. Ku sawir muunadda tuubada.
Isticmaalka aaladda tuubooyinka tooska ah.
· 10-200 mu 1 dhibic dhaqdhaqaaqa dareere ah ayaa loo isticmaali karaa inta badan dhibcaha muunada. Godad muunad aad u yar yar (in ka yar 10μ1), madaxa pipette dheer ee loo isticmaalo isku xigxiga xabagta ayaa aad ugu habboon.

Dhuumaha oo hadda lagu dhex milmay muunadda, oo la nuugayo dareere si tartiib ah u socda. Muunadu waxay u muuqan kartaa mid ku dheggan glycerin, bamgareynta degdega ah waxay u soo jiidi kartaa xumbo hawada madaxa pipette.

Shaybaarada ka dib marka la nuugo madaxa tuubooyinka, waxay si tartiib ah ugu dhaqaaqi doonaan madaxa dareeraha cidhifka tuubada ama tirtiridda warqaddu waxay nuugtaa madaxa dareeraha ah ee ka baxsan dhibcaha. Ka taxadar inaadan nuugin muunada.

Sambalka geli godka muunada

Qalabka tuubooyinka si uu cadaadis yar u ilaaliyo, ka dhig shaybaarada in yar u dhaqaaqo madaxa dareeraha qulqulaya.
Madaxa dhuumaha oo la geliyo meesha wax lagu kaydiyo, oo waxyar ka sarreeya godadka barta, sii wad cadaadiska wanaagsan. Cirifka pipette waxaa la gelin karaa dalool yar.
Si tartiib ah oo joogto ah shaybaarada ayaa loo soo saaray. Caarada pipette waxaa la dhigayaa meel ka sarraysa daloolka muunadda dhibicda, muunadu waxay ku degi doontaa godka. Sambalku ha quuso si uu u buuxiyo daloolka muunada halkii aad ka riixi lahayd.
Marka dhibicda u dambaysa ee muunada leh madaxa dareeraha ah, dareeruhu waxa uu u dhaqaaqi doonaa lugta labaad, si tartiib ah kor ugu qaadi doona dareeraha, ka guuri doona kaydka

Sidee loo sameeyaa tijaabada xabagta tooska ah?

godad muunado xabag toosan oo ka dhex samaysmay laba koob oo quraarad ah. Xabagta dhuuban ee dhuuban, madaxa pipette xitaa lama dhex gelin karo laba saxan oo galaas ah dhexdooda. Daawo glycerin! Madaxa pipette dul dhig daloolka muunada oo muunadku godka ayuu ku dagi doonaa.
Tusaalaha dhibcaha ka hor, hubi inaad geliso barta toosan ee godka muunada ee polypropylene acyl gel si nadiif ah loo dhaqay. Ka maydh acrylamide-ka aan-polymer-ka lahayn iyo biyaha laga yaabo inay ka soo baxaan gunta godka muunada. Biyuhu waxay ka dhigi karaan daloolka muunada si aad u yar. Isticmaal sirinji 25ml ama 50ml ah iyo irbad 18 cabbir ah. Ku shub qalabka elektrophoresis-ka oo si taxadar leh u dhaq dalool muunadda.
· Way adkaan kartaa in la arko daloolka muunadda, laakiin si la mid ah, inta soo hartay way fududahay. Haddii ay jiraan daloolo xad-dhaaf ah, muunadda kaydinta waxaa lagu tijaabin karaa buluug bromophenol.